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干货分享:如何挑选合适的Flag标签抗体?
发布时间:2017-01-03        浏览次数:663        返回列表
 Flag标签体系是已被公认的用于表达、纯化以及检查交融蛋白的表达体系,广泛应用于Western blotting、免疫细胞组化、免疫共沉淀、流式细胞术、蛋白纯化以及蛋白相互作用、蛋白别离等多个研讨范畴。Flag标签是一个与重组蛋白相交融的由 8个亲水氨基酸(DYKDDDDK)构成的多肽片断。Flag标签只要8个氨基酸构成,因而它不会占有别的表位与联系域,避免致使交融蛋白的功能、排泄性以及转运发作改动。由于它的亲水性特色,Flag标签倾向于定位在交融蛋白外表,因而更易与抗体联系以及被肠激酶酶解。

Flag抗体推荐—可进行WB/IF/IP检测应用

干货分享:如何挑选合适的Flag标签抗体?

我们在选择Flag抗体时,主要根据自己的需要,特别是实验应用上的需要。另外,一个抗体检测后的应用类型越多,在使用过程中的选择余地就越大;而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。 另外,抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面,也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl Flag抗体(假如其WB检测的稀释比率是1:5000,终使用液相当于500ml),要比效价低的1ml的Flag抗体(假如WB检测的稀释比率是 1:200,终使用液相当于200ml)性价比更高。

Abbkine的Flag标签抗体的效价有点超出意料。做WB实验时,次按照说明书推荐的1:1000,显示的条带很强,后来不断的稀释摸索条件,1:10000稀释的时候做WB条带仍然是很不错的。 ——中山大学医学部一客户

Flag抗体推荐—可进行WB/IF/IP检测的Flag标签抗体
产品名称及描述 货号 产品说明
Anti-Flag Tag Mouse Monoclonal Antibody (1B10) Abbkine A02010 详情
Anti-Flag Tag Rabbit Polyclonal Antibody Abbkine A02011 详情
HRP Conjugated Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody (1B10) Abbkine A02015 详情

 

为什么推荐Abbkine的Flag抗体?干货分享:如何挑选合适的Flag标签抗体?

Flag系统是Sigma-Aldrich®拥有的系统,因此Sigma的Flag标签抗体是之前诸多客户的选择。Sigma的Flag标签抗体主要有M1和M2两种克隆号的抗体,其中M1克隆号的Flag抗体可用于检测Flag标签位于N末端的重组蛋白,而M2克隆号的Flag单克隆抗体则可以检测的Flag标签蛋白。其2010年的中国报价分别为¥4649/200μg和¥3683/200μg。

Sigma Flag标签抗体假如您想选择一款性价比更高的Flag标签抗体,那Abbkine可能是另一个优先选择,其价格比Sigma要低30%左右。Abbkine的Flag标签抗体 Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody(货号#A02010)可以用于检测和Flag标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测Flag融合表达蛋白(包括N末端、C末端)等。该Flag抗体为小鼠源单克隆抗体,其免疫原为KLH偶联的Flag标签(DYKDDDDK)多肽。另外,Abbkine还同时提供经HRP偶联的Flag标签抗体,尤其适合IP-WB验证时去除二抗的干扰;兔源多克隆Flag抗体也为客户提供另一种Flag标签的检测方案。

Flag抗体推荐—可进行WB/IF/IP检测的Flag标签抗体
产品名称及描述 货号 产品说明
Anti-Flag Tag Mouse Monoclonal Antibody (1B10) Abbkine A02010 详情
Anti-Flag Tag Rabbit Polyclonal Antibody Abbkine A02011 详情
HRP Conjugated Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody (1B10) Abbkine A02015 详情

 

Abbkine的Flag单克隆标签抗体不仅能应用于细胞内定位的IF实验,同样还能应用于IP实验。1:200甚至更高的IP实验稀释比率,也说明了该抗体本身的具有很高的效价,同时,因为是单克隆抗体,因此特异性也很高。高效价所对应的高稀释比率也意味着高性价比。对于WB实验,其说明书的推荐起始稀释比例是1:1000,但在在1:5,000的稀释比率下也表现优异(Abbkine也进行了10,000次以后的稀释,仍然显示出很好的条带显示,没有在说明书里列出)。下图为Abbkine的Flag抗体的应用图示。


一个高效价的抗体不仅影响实验结果的灵敏度,还意味着更高的性价比。Abbkine的Flag标签抗体(货号#A02010)在常规的WB实验里, 推荐的起始稀释比率为1:1000,实际在Abbkine的应用中,还有1:10,000甚至更高的稀释比率,需要根据客户具体的实验条件进行进行优化。
 

Abbkine还提供大包装1ml的Flag标签抗体,非常适合经常进行His标签系统免疫学检测的实验需求。为方便客户的使用, 上述产品,Abbkine均在中国备有现货。Abbkine针对中国市场,提供化的产品质量追踪和售后服务以及保障,如果您在使用过程中有任何问题, 请直接与其当地代理商艾美捷科技有限公司联系。干货分享:如何挑选合适的Flag标签抗体?

Flag抗体推荐—可进行WB/IF/IP检测的Flag标签抗体
产品名称及描述 货号 产品说明
Anti-Flag Tag Mouse Monoclonal Antibody (1B10) Abbkine A02010 详情
Anti-Flag Tag Rabbit Polyclonal Antibody Abbkine A02011 详情
HRP Conjugated Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody (1B10) Abbkine A02015 详情

 

美国Abbkine是一家提供高性价比免疫学和细胞学科研产品及解决方案的,艾美捷将其引入中国,作为其中国Flag抗体推荐—可进行WB/IF/IP检测的Flag标签抗体区域代理,将为客户提供性价比的常规免疫学试剂,如各种标签抗体、内参抗体、常规一抗以及全系列二抗,抗体检测底物以及相关试剂盒等。同时我们作为多家的的中国代理或 区域代理,艾美捷能为您提供系列的实验室解决方案。如果您对上述产品感兴趣,请致电免费客户专线400-6800-868到艾美捷科技有限公司垂询相关的产品信息及完整实验解决方案。