艾美捷Agrisera丨AtpB | 阳性对照/定量标准品基本参数:
格式 冻干,在甘油中。
数量 100 微升
重组 如需复溶,请添加 90 µl 的 milliQ 水,请注意该产品含有 10% 甘油,可能呈液体状,但以冻干形式提供
贮存 在 -20°C 下储存冻干/复溶;一旦重组,制作等分试样以避免重复冻融循环。请记住在打开试管之前先稍微旋转试管,以避免材料粘附在试管盖或试管侧面而造成的任何损失。
测试应用 蛋白质印迹 (WB)
推荐稀释
标准曲线:推荐 3 次加载(0.5、2 和 4μl)。
对于大多数应用,0.2μg 叶绿素的样品负载将在此范围内产生 AtpB 信号。
阳性对照:每孔上样量:2μl 上样量是大多数化学发光检测系统的佳选择。
请注意,本品含有 10% 甘油,可能呈液体状,但以冻干形式提供。加水后让其溶解几分钟。彻底但轻轻地混合 每次使用前要格外小心地彻底混合,因为蛋白质在冷冻后往往会沉淀在更致密的层中。
预期 | 表观分子量:在大多数凝胶系统中,AtpB 迁移约 50-54 kDa
艾美捷 Agrisera丨AtpB | 阳性对照/定量标准品应用示例:
图:在4-12 % NuPage ( Invitrogen ) LDS - PAGE和_用PVDF吸干 1 小时. 在室温下搅拌 1 小时,在 20 mM Tris、137 mM 氯化钠 pH 7.6 和 0.1% (v/v) Tween-20 (TBS-T) 中转移 2% 封闭试剂后立即封闭印迹。将印迹在 1: 50 000 稀释度的一抗中在室温下搅拌孵育 1 小时。将抗体溶液倒出并将印迹短暂冲洗两次,然后在室温下在搅拌下在 TBS-T 中洗涤一次 15 分钟和 3 次 5 分钟。将印迹在 2% 封闭溶液中稀释至 1:50 000 的二抗(结合抗母鸡 IgY 辣根过氧化物酶)中在室温下搅拌孵育 1 小时。如上洗涤印迹并根据制造商的说明用化学发光检测试剂显色5分钟。
注意:准确定量是使用每个凝胶泳道的中等上样量实现的,通常为 0.5 至 2.5 ug 总蛋白,具体取决于目标蛋白的丰度。
艾美捷 Agrisera丨AtpB | 阳性对照/定量标准品参考文献:
弗雷泽等人。(2013)。集胞藻铁饥饿过程中的光生理和光合复合物变化。PCC 6803 和细长聚球藻 PCC 7942。PLOS ONE。
Agrisera 研究包含1000种用于植物和藻类细胞生物学研究的一抗,2000多种二抗。抗体分两大类:植物及藻类的抗体,以及细菌、真菌、昆虫、鱼等动物类抗体。艾美捷科技是Agrisera的中国代理商,为科研工作者提供的产品与服务。