步,准备好DNA样品,样品来源可以是基因组DNA,ChIP拉下来的DNA或者用其他手段特异性富集到的DNA;
第二步,末端修补并加 A尾,用基因工程酶将已打断的DNA片段修饰成平末端后,在DNA的3'端加上一个A尾,以方便后续的接头连接;
第三步,分别在DNA片段的两端加上adapter;
第四步,在完成接头连接后的文库接着再进行高保真PCR扩增,并完成磁珠纯化,即制备成为可用于上机测序的文库。
基于这个原理,再来说一说艾美捷Epigentek的各种二代测序盒子和它们各自的特点:
1、P-1051 DNA Library Preparation Kit (Illumina)
特点:操作简便,少于2.5h;样本:DNA;上样量:5ng to 1ug
2、P-1053 High-Sensitivity DNA Library Preparation Kit (Illumina)
特点:灵敏度高;样本:DNA;上样量:0.2ng to 100ng
3、P-1055 Post-Bisulfite DNA Library Preparation Kit (Illumina)
特点:亚硫酸转化DNA文库;样本:DNA;上样量:0.5ng to 1µg
4、P-1056A High-Sensitivity Bisulfite-Seq Kit (Illumina)
特点:亚硫酸转化DNA文库,高灵敏度;样本:DNA;上样量:0.2ng to 200ng
5、P-2030 ChIP-Seq High-Sensitivity Kit (Illumina)
特点:染色质免疫共沉淀测序DNA文库;样本:哺乳动物细胞、组织;上样量:细胞-1*105 to 1*106 组织-5mg to 50mg
*以上二代测序文库均适用于Illumina测序平台。
除了上述的DNA测序文库外,艾美捷Epigentek还力荐5-mC RNA Bisulfite-Seq文库,助力研究quan面而丰富!
Epigentek研究包括400多个砖利组合,为表观遗传学方面的研究和新药研发提供全面系统的解决方案。艾美捷科技是Epigentek的中国代理商,为科研工作者提供的产品与服务。