Enzo Life Sciences 艾美捷MITO-ID系列线粒体膜电位检测试剂盒——用一种阳离子染料测量线粒体膜电位,根据膜电位状态发出绿色或橙色的荧光。在有能量的细胞(膜电位较高)中,染料在细胞质中以绿色荧光单体存在,同时在线粒体中以橙色荧光聚集体的形式聚集。然而,在线粒体膜电位受损的细胞(膜电位较低)中,染料主要以绿色荧光单体存在于整个细胞质中,在线粒体中不再表现出橙色荧光。
背景:
线粒体功能的损害越来越多地与药物毒性的病因有关。线粒体通过氧化磷酸化以三磷酸腺苷(ATP)的形式产生 >90% 的细胞能量需求。线粒体是细胞代谢活动的关键调节器,也是自由基产生和降解的重要细胞器。人们认为较高的线粒体拷贝数(或较高的线粒体质量)对细胞具有保护作用。
线粒体膜电势的破坏是细胞凋亡早期发生的一个标志性事件。细胞受到凋亡诱导后线粒体膜电位的变化使得膜的通透性发生改变。膜通透性的增加,使得线粒体蛋白包括细胞色素C、Smac/DIABLO、HtrA2/OMI、核酸内切酶G(EndoG)、凋亡诱导因子(AIF)等从线粒体基质释放到细胞浆。细胞色素C的释放伴随膜电位的完全丧失,进而引发细胞凋亡酶的级联效应。
MITO-ID 红色和绿色染料突出显示线粒体,无论其能量状态如何(线粒体膜电位)。这些染料与大多数荧光检测系统兼容,包括常规和共聚焦荧光显微镜,以及高内涵筛选 (HCS)平台。该试剂盒可用于评估线粒体形态变化和估计线粒体质量。Enzo Life Sciences 艾美捷MITO-ID 红色和绿色染料的一个重要应用是与荧光蛋白的荧光共定位成像。这是一种强有力的方法,用于确定细胞区室内的分子靶向,以及筛选这些分子之间的关联和相互作用。此外,Enzo Life Sciences 艾美捷该试剂盒还适用于结合荧光探针(如标记抗体)的活细胞或固定后细胞。
Enzo Life Sciences 艾美捷MITO-ID 线粒体膜电位检测试剂盒特点:
比JC-1荧光染料灵敏10倍,水溶性好;
耐光双发射染料;
无需漂洗/换液过程;
单独的MITO-lD测定可用于检测线粒体质量;
在较低的药物/剂量浓度下检测细胞毒性;
没有像JC-1配方那样的溶剂伪影。