Enzo Life Sciences 艾美捷MITO-ID系列线粒体膜电位检测试剂盒——用一种阳离子染料测量线粒体膜电位,根据膜电位状态发出绿色或橙色的荧光。在有能量的细胞(膜电位较高)中,染料在细胞质中以绿色荧光单体存在,同时在线粒体中以橙色荧光聚集体的形式聚集。然而,在线粒体膜电位受损的细胞(膜电位较低)中,染料主要以绿色荧光单体存在于整个细胞质中,在线粒体中不再表现出橙色荧光。
Enzo Life Sciences 艾美捷MITO-ID 线粒体膜电位检测试剂盒特点:
比JC-1荧光染料灵敏10倍,水溶性好;
耐光双发射染料;
无需漂洗/换液过程;
单独的MITO-lD测定可用于检测线粒体质量;
在较低的药物/剂量浓度下检测细胞毒性;
没有像JC-1配方那样的溶剂伪影。
Enzo Life Sciences 艾美捷MITO-ID 线粒体膜电位检测试剂盒作用机制:
该染料的基本化学结构由高度共轭的部分组成,使正电荷广泛离域,从而允许电泳吸收到J化的线粒体内膜的带负电荷的基质相。该染料能够选择性地进入线粒体,当膜电位增加时,它的颜色会从绿色可逆地变为橙色(双发射电位探针)。这种光物理特性是由于在膜J化时可逆地形成J-聚集体,导致在490nm处激发时,发射光从~530nm(单体染料的发射)转移到590nm(J-聚集体形式的发射)。因此,具有低膜电位的线粒体将积累低浓度的染料,并表现出绿色荧光,而更高J化的线粒体将表现出橙色的荧光。
Enzo Life Sciences 艾美捷MITO-ID 线粒体膜电位检测试剂盒的应用:
左图:HeLa细胞的线粒体用 MITO-ID 膜电位染料染色,并通过落射荧光显微镜观察。橙色荧光聚集体定位于线粒体(橙色通道),而绿色荧光单体主要染色细胞质(FITC通道)。
右图:对照组和处理组细胞的流式细胞术分析。Jurkat细胞未经处理(左),用1μM CCCP处理15分钟(右)。然后用MITO-ID 膜电位染料对细胞进行染色,并在FACS Calibur仪器上运行。