在Western blot实验中,选择作为内参的蛋白质具有与目标蛋白质不同的分子量,以便区分和量化目的蛋白条带。
如何选择合适的植物内参抗体?
首先,考虑样本来源,植物样本需要选用植物细胞表达稳定的蛋白比如Actin或者Rubisco作为内参。
其次要考虑目的蛋白的分子量大小,推荐内参要与检测的目的蛋白的分子量相差5kD以上,以区分目的蛋白条带。
,考虑目的蛋白的表达定位,选择对应的内参抗体,比如,全细胞、细胞核、线粒体等等。同时,在特定条件下,内参蛋白的表达会出现异常,应该将其考虑在内。
鉴于以上,Agrisera植物内参抗体尤为合适。其优势是适用于植物和藻类,而且在很多种属类型中得到验证,发表过很多文献,应用范围广泛。
Agrisera植物内参抗体的分子量和表达定位:
组蛋白H3抗体应用于WB(拟南芥)和免疫细胞化学分析(蚕豆)的实例: